紫外分光光度法测定黄芪多糖的含量
[关键词:紫外分光光度法,黄芪,多糖] [热度 ]提示:此毕业设计论文完整版包含【论文,文献综述】 作品编号:zygc0274,word全文:12页,合计:6000字 |
目的:对市面上所售黄芪饮片所含的黄芪多糖进行含量测定,判断其黄芪多糖含量是否符合药典标准,科学评价药材的质量是否合格。本论文对从市面上购买的黄芪饮片进行黄芪多糖含量的测定,准确判断其黄芪质量的好次,科学评估该厂家黄芪饮片的质量,保证用药的安全和可靠性。方法:用水提醇沉提取法将从市面上购买的三种不同厂家的黄芪生药饮片中的黄芪多糖提取出来,采用苯酚—硫酸的条件反应后比色测定黄芪多糖的含量大小;利用紫外分光光度测定仪测定具有一定梯度浓度的葡萄糖标准品溶液的吸光度,根据吸光度和葡萄糖浓度,绘制标准曲线,得到回归方程;用紫外分光光度法测定黄芪多糖的含量。结果:从市面上购买的不同厂家的黄芪饮片中所含的黄芪多糖含量均符合药典标准,其质量都是合格的。
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黄芪多糖的提取
水提醇沉法[14]是利用黄芪多糖在水中的溶解性,因此可以用蒸馏水将黄芪多糖从黄芪饮片提取出来,再利用多糖不溶于乙醇,所以就看可以利用乙醇将已经溶解于水中的黄芪多糖以沉淀的形式分离出来。
操作步骤:
使用电子天平精密称取黄芪饮片50g,使用量筒(已经清洗干净并用乙醇润洗过)精确量取8倍量400ml的蒸馏水,加入1000ml的圆底烧瓶内。
将电子万用炉、球形冷凝管、三通(已经绑好气球)按照从下至上的顺序依次搭建好回流装置,保持其稳定性;打开电子万用炉,等到第一滴冷凝回流液滴下的时候开始计时,回流计时2h,收取回流液备用。
上步剩余残渣再次加入6倍量300ml的蒸馏水,加入至上步的1000ml的圆底烧瓶内,打开电子万用炉,等到第一滴冷凝回流液滴下的时候开始计时,回流计时1.5h。
收取回流液备用,剩余残渣再次加入4倍量200ml的蒸馏水,加入至上步的1000ml的圆底烧瓶内,打开电子万用炉,等到第一滴冷凝回流液滴下的时候开始计时,回流计时1h。
合并上述三步的冷凝回流液,用氨水(AR)将PH调至弱碱性,使用电子万用炉加热浓缩至50ml。
将浓缩液用离心机以2000r/min离心10min,上清液加三倍量的无水乙醇(AR)沉淀,静置12h滤去上层的澄清液体,将下层沉淀物中再加入无水乙醇(AR)至浓度为80%,静置12h。
顷去上清液滤渣用丙酮(AR)洗涤两次,使用真空泵、布氏漏斗、抽滤瓶对其进行抽滤。将滤渣放入干燥箱干燥,即可得到黄芪多糖。
标准品溶液的配制
用电子天平精密量取葡萄糖100mg,加入到100ml容量瓶,加蒸馏水稀释定容,摇匀备用。使用移液管精密量取10ml,加入到100ml容量瓶内,加入蒸馏水稀释至刻度,摇匀。
配制成0.1mg/ml的葡糖糖标准溶液[15]。
5%苯酚水溶液的配制
使用电子天平精密称量5g苯酚(AR)加入至200ml小烧杯中,使用移液管精确量取95ml的蒸馏水,不停搅拌至完全溶解(不溶的时候可适当加热),将......
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