目的  采用响应面分析法对水蓼总黄酮提取工艺进行优化；同时研究其不同极性的萃取物浸膏对致病性大肠杆菌的体外抑菌活性。方法  在单因素实验的基础上，以总黄酮含量为评价指标，采用响应面分析法研究料液比、超声时间及乙醇浓度对水蓼总黄酮提取率的影响。用牛津杯法及最小抑菌浓度法，评价水蓼不同极性的萃取物对致病性大肠杆菌的抑菌活性。结果  水蓼总黄酮的最佳提取工艺条件：料液比为1:38 g/mL，乙醇浓度为66%，超声提取3次，每次37 min。在此条件下水蓼总黄酮含量为6.0847 mg/g，与模型预测值6.3494 mg/g接近。在水蓼不同极性的萃取物中，以乙酸乙酯萃取物的抑菌活性最强，抑菌圈直径为136.8±0.08 mm，最低抑菌浓度（MIC）为25 mg/mL。结论  通过响应面分析法优化水蓼总黄酮提取工艺条件简单可行，可为工业化生产提供参考。水蓼体外抑制致病性大肠杆菌的活性部位为乙酸乙酯萃取物。

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供试品溶液的制备及含量测定

干燥后的水蓼打粉过40目筛。取1 g辣蓼粉末于100 mL的锥形瓶中，用适宜的超声时间和功率、乙醇浓度、料液比进行提取，合并滤液，浓缩，用提取溶剂定容至10 mL，得到水蓼供试品溶液。精密量取1 mL供试品溶液于10 mL量瓶中，按“3.1.2”项下方法显色、定容并于505 nm波长处测定吸光度，根据回归方程计算样品液中总黄酮的质量浓度，按公式“总黄酮含量（mg/mL）=C×D×V/m”计算总黄酮含量。式中：C为回归方程计算出的浓度（mg/mL）,D为测定时定容体积（mL），V为提取液定容体积（mL），m为样品质量（g）。

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通过拟合好的二次多元回归方程，为了进一步直观说明料液比、乙醇浓度、提取时间以及各因素之间的交互作用对水蓼总黄酮提取含量的影响。利用Design-Expert 8.0 软件根据回归分析结果导出相应的曲面图和等高线图，可以反映出交互作用的强弱，椭圆形表示两因素交互作用显著，圆形则相反[24]。响应面分析结果见图7-9。

从图7可以看出，料液比与提取时间的交互作用对水蓼总黄酮含量的影响不显著，表现为曲线较平缓，与方差分析结果一致。从图8可以看出，乙醇浓度与提取时间的交互作用对水蓼总黄酮含量的影响不显著，表现为曲线较平缓，与方差分析结果一致。从图9可以看出，当乙醇浓度为60%时，在料液比（mL/g）20-40范围内，随着料液比的增加，总黄酮含量在逐渐增加，当料液比大于38时，总黄酮含量缓慢下降。当乙醇浓度为70%时，随着料液比的提高，总黄酮含量逐渐升高，并出现极值。与方差分析结果一致，即料液比与乙醇浓度的交互作用差异显著。