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鹿角蛋白的提取工艺优化及其对小鼠肾虚模型的疗效

[关键词:鹿角蛋白,提取工艺,肾虚模型]  [热度 ]
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作品编号:zyx0068,word全文:18页,合计:7000

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鹿角蛋白的提取工艺优化及其对小鼠肾虚模型的疗效毕业设计论文------

目的 优化鹿角蛋白的提取工艺,并考察对小鼠肾虚模型的药理作用。方法 采用正交试验优选的鹿角蛋白提取工艺,利用羟基脲作为造模药,六味地黄丸作为阳性对照药,观察小鼠的体重、自主活动次数以及器官重量的指标变化。结果 最佳提取工艺为提取时间2h,提取次数4次,料液比1:20,使用鹿角蛋白治疗的肾虚小鼠各项指标均与阳性对照组无明显差别。结论 制备工艺合理,鹿角蛋白对肾虚小鼠有显著疗效。

......

最佳测定波长的选择

精密吸取对照品溶液和供试品溶液1mL,于25mL具塞试管中,再分别加入5mL碱性铜溶液,摇匀,室温下放置10min;再加入0.5mL酚试剂,摇匀,室温下放置40min。以相应溶液为空白,在400 -800 nm波长范围内进行光谱扫描。结果对照品溶液与供试品溶液均在650nm波长处有最大吸收,故确定测定波长为650nm。

标准曲线的绘制  

精密吸取牛血清白蛋白对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1mL(相当于牛血清白蛋白60μg、120μg、180μg、240μg、300μg)于25mL具塞试管中,加水补足至1mL,再分别加入5mL碱性铜溶液,摇匀,室温下放置10min;再加入0.5mL酚试剂,摇匀,室温下放置40min。以相应溶液为空白,在650nm处测定吸光度,以牛血清白蛋白含量(X)为横坐标、吸光度(A)为纵坐标绘制标准曲线,如图1。

......

液料比(鹿角粉:水)对鹿角蛋白提取的影响

取 10g 鹿角粉4份,按料液比(g:mL)1:5,1:10,1:15,1:20加纯水,提取 4 次,每次2h,分别合并4份提取液,提取液3000r/min离心15分钟,取上清液抽滤,取上清液0.5ml至10mL离心管中,加水补足至10mL,3000r/min离心15分钟,既得供试品溶液。取4份供试品溶液按3.1.3项的方法操作,在650nm波长下测定吸光度,代入3.1.3项中得到的回归方程,计算得到各供试品的蛋白质含量,结果见表3。

......

结论

以总蛋白质作为考察指标,采用三因素三水平正交试验,优选鹿角中药材的最佳提取工艺,并结合实际生产的能耗和效率问题,最终确定最佳提取工艺为:提取时间为2h,提取次数为4次,料液比为1:20。

用羟基脲作为造模药,六味地黄丸作为阳性对照药,以肾虚小鼠的体重、自主活动次数以及器官重量的变化为指标,观察数据得到结论:鹿角蛋白高剂量组对肾虚小鼠的治疗效果较为显著,中剂量组和低剂量组治疗效果不显著。 

 

 


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