目的：以菊花为原材料，通过正交试验结合抗菌活性实验设计优选抗菌作用最佳的提取工艺。方法：采用超声法、冷浸法、回流法、等几种提取方法，以菊花总黄酮量含量和抑菌活性为指标，采用正交试验结合抗菌活性实验进行综合评价。结果：从药物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌产生的的抑菌圈大小以及总黄酮含量来看，以70%乙醇为溶剂，料液比为1:20，在80℃下回流提取4 h的条件下的回流提取工艺抗菌作用最佳。结论：回流法为抗菌作用最佳的提取工艺，本实验结论可为菊花浸膏最佳工艺的确定提供依据。

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对照品溶液的制备

选取1个25 ml的容量瓶，先用甲醇润洗，然后精密称取芦丁对照品5mg置于其中[11]，加适量甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀为对照品溶液，备用[12]。

标准曲线的绘制

选取6个10 ml的容量瓶，然后精密量取对照品溶液0、1、2、3、4、5 ml[13]，分别置于容量瓶中。分别向6个容量瓶中加入0.3 ml 5 %的亚硝酸钠溶液，将其震荡摇匀后，静置放置6 min，再加入0.3 ml 10 %的硝酸铝溶液，同样将其震荡摇匀后，静置放置6 min，最后加入4 ml 4 %的氢氧化钠溶液，然后加甲醇定容至刻度，摇匀，静置放置15 min；

采用分光光度法，先确定最大吸收波长，通过从700 nm到200 nm进行扫描，发现在510 nm处有最大吸收峰，因此确定最大吸收波长为510 nm；以吸光度A为纵坐标，以标准液浓度(mg/ml)为横坐标，绘制标准曲线[14]。

总黄酮含量的测定

选取1个50 ml的容量瓶，吸取2.5 ml供试液置于其中；加入1.5 ml 5 %的亚硝酸钠溶液，将其震荡摇匀后，静置放置6 min，再加入1.5 ml 10 %的硝酸铝溶液，同样将其震荡摇匀后，静置放置6 min，最后加入20 ml 4 %的氢氧化钠溶液，然后加30 %（V/V）乙醇定容至刻度，摇匀，静置放置15 min；采用分光光度法，在510 nm处测定吸光度。然后根据标准曲线计算得出总黄酮含量[15]。

抑菌活性测定的方法

提取物的处理

将不同提取方法提取得到的浸膏置于烘箱中干燥得到固体，然后将所得菊花浸膏固体用10 ml蒸馏水水浴溶解，过滤，备用。

菌液浓度的选择

先将所用的细菌进行摇菌24 h活化[16]。活化完成后采用梯度浓度法，配制含有不同浓度的菌液，将配置好的菌液在相同的环境下进行培养，最后的培养结果显示最适的菌液浓度为105 cfu/ml。

牛津杯加样量的选择

在大多数的抗菌实验测定中，都会把牛津杯加满[17]。因为......