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金银花与忍冬叶的提取物的抗菌作用比较

[关键词:金银花,忍冬叶,抗菌作用]  [热度 ]
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作品编号:zygc0096,word全文:12页,合计:7200

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金银花与忍冬叶的提取物的抗菌作用比较毕业设计论文------

目的:研究金银花与忍冬叶提取物对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的体外抑菌活性的差异。 方法:分别用30%、50%、70%浓度的乙醇在恒温水浴锅中加热回流,对金银花与忍冬叶药用成分进行提取,再以牛津杯抑菌圈法测定不同浓度的乙醇花叶提取物对供试菌体的抑菌作用。结果:70%浓度的乙醇对金银花及忍冬叶药用成分的粗提取率最高。金银花与忍冬叶的乙醇提取物均对供试的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用。其中,金银花的提取物对大肠杆菌的抑菌效果较好,忍冬叶的提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好。

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金银花、忍冬叶药用成分的提取

(1)将金银花蕾、忍冬叶于中药粉碎机粉碎,分袋装好。

(2)用无水乙醇与蒸馏水分别配制30%、50%、70%浓度乙醇,分别置于250ml广口瓶中贴好标签保存,备用。

(3)准确称量金银花粉末5g置于250ml容量的圆底烧瓶,量取30%浓度的乙醇50ml,倒入圆底烧瓶。

(4)按照规范操作,搭好加热回流装置,将药液混合后的圆底烧瓶置于装置相应位置上,开始加热计时。

(5)第一次加热回流时长为1.5小时。过滤,留滤液。

(6)滤渣转移至圆底烧瓶中进行第二次加热回流。

(7)第二次加热回流时长为1小时。过滤,留滤液。合并两次所得滤液。

(8)将所得滤液置于旋转蒸发仪上旋蒸,留有少量液体即可。

(9)按照上述1-8步骤分别用50%、70%浓度的乙醇对金银花粉末以及忍冬叶药用成分进行回流提取。

标准曲线的绘制

(1)配置浓度为0.2mol/L盐酸:量取17ml盐酸溶液(浓度为37%)于1000ml的大量筒,加水定容至刻度,转移至1000ml的广口瓶中加塞保存,备用。

(2)标准溶液的制备:精确称量绿原酸标准品5mg于50ml容量瓶中,加0.2mol/L盐酸定容至刻度,用手指紧按住瓶塞,上下摇晃至药液均匀,配制为0.1mg/ml的标液,备用。

(3)精密量取五组0.1mg/ml标液(0.25ml、0.5ml、1ml、2ml、4ml)于25ml容量瓶中,盐酸定容至刻度,摇匀,标记备用。

(4)最大吸收波长的确定:根据参考文献,李耀仓等人在金银花中提取绿原酸的研究中表明,测定绿原酸标准品的最大吸收波长为330nm。李春燕等人在金银花中不同提取方法的方法比较早中,根据文献选择325nm、327nm吸收波长,最终选择327nm为最大吸收波长。周蕙燕等人在金银花提取物中绿原酸含量测定时,检测最大吸收波长为327nm[6-8]。因此在测定吸光度时,设置327nm为最大吸收波长。

(5)标准曲线的绘制:在紫外分光光度计中测定配置好的标准溶液的吸光度。将测得的标准溶液的浓度数值设为横坐标,吸光度数值设为纵坐标,用电脑Excel表格根据所得实验数据绘制出绿原酸的标准曲线。

将移液管清水洗净并润洗后,移取浓缩后得到的提取液0.1ml,置于25ml容量瓶中,用0.2mol/L的盐酸定容至刻度,用手指紧按住瓶塞,上下摇晃至药液均匀。置于......

 

 


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