目的：建立高效、特异、准确的鱼饲料中氟苯尼考残留检测方法。方法：将鱼饲料经过乙酸乙酯提取，正己烷脱脂，薄层色谱净化后，再经高效液相色谱仪检测。结果表明：氟苯尼考标准品浓度10-100 μg/L的范围内线性良好，线性回归方程为y = 168154x – 91465，R2 = 0.9994；方法的定量限是1000 μg/L,检测限为31.25 μg/L；平均回收率在85.3%-114.8%，日间相对标准差小于8.8%，表明该方法可用于鱼饲料中氟苯尼考含量检测。

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本课题拟采用薄层层析法来净化样品，建立鱼饲料中氟苯尼考含量检测的分析方法，为氟苯尼考含量监控提供有力的工具，也为定量分析方法学研究提供新的思路。

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标准曲线的建立

将空白鱼饲料加入适量的标准储备液，使鱼饲料中含药物浓度分别为200.00，100.00，50.00，10.00，1.00，0.10，0.050 μg/mL分别按照2.2.2的样品制备方法进行提取净化，高效液相色谱法检测，每个浓度样品测定1次，将所得峰面积与对应添加浓度进行拟合，绘制工作曲线，分别求出药物在各种鱼饲料的工作曲线回归方程和相关系数。

样品前处理

精密称取鱼饲料2g，分别加入氟苯尼考1.00 μg/g，100.00 μg/g，1000.00 μg/g中各五组，做三个批次，加以乙酸乙酯20 mL，摇匀涡旋2 min后室温下10000 r/min离心5 min，收集上清液1 mL，于45 ℃水浴下氮气吹干，50 mL乙腈溶解，用1 mL乙腈饱和正己烷脱脂,去掉上层液正己烷，然后用薄层色谱法净化，在展开剂中薄层展开，刮去样品，1 mL流动相溶解，将其一并放入超声仪中超声萃取10 min，再涡旋2 min，10000 rpm离心5 min，用注射器过0.45 μm膜将液体装入进样瓶中，高效液相色谱法检测。 

色谱条件

色谱柱为Waters Symmetry C18(250 mm×4.6 mm i.d.，5 μm)，流动相A为乙腈，流动相B为水，流动相A和B之比为70:30。流速：0.4 mL/min，进样量为50 μL，柱温为32 ℃。

方法性能的考核

检测限与定量限

不同浓度的标准品，液相色谱检测，测定噪音S和信号N，以达到S/N大于3时浓度的最低浓度为该方法的检测限。

取空白的鱼饲料加入适当浓度的标准溶液，使样品中含有较低浓度的药物，按照2.2.1所述的样品制备方法制备后进行高效液相色谱法检测，每个浓度重复5次，在不同时间重复操作5次，以回收率和变异系数均达到定量分析要求时样品的最低浓度确定为方法的定量限。

准确度与精密度

将空白鱼饲料加入适量标液，使之成为200.00，100.00，50.00，10.00，1.00，0.10，0.050 μg/mL，200.00 μg/mL按照2.2.2的样品制备方法进行提取净化，高效液相色谱法检测，每个浓度样品测定5次，重复5天，分别计算回收率、样品日内、日间相对标准偏差及日间......