高效液相色谱法测定鸡血浆中氟苯尼考含量
[关键词:氟苯尼考,高效液相色谱法] [热度 ]提示:此毕业设计论文完整版包含【论文,文献综述】 作品编号:zygc0066,word全文:12页,合计:7700字 |
目的:测定在鸡血浆中不同浓度的氟苯尼考标准品溶液的含量。方法:血浆样品用乙酸乙酯提取,经薄层色谱净化后用高效液相色谱检测,最后采用外标法定量。结果:氟苯尼考在0.3125-10 μg/mL浓度范围内,标准曲线线性关系良好(r>0.9997),在标准物质出峰时间的周围没有杂质干扰;方法的最低检测限为31.25 ng/mL,最低定量限为100 ng/mL;平均回收率在83.1 %-98.0 %,相对标准差都小于8.9 %。本方法高效低廉,操作简便,结果准确,可行性强,可用于鸡血浆中氟苯尼考含量测定的药动学研究。
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前言
氟苯尼考,是20世纪80年代美国先灵-葆雅公司[1]为寻找更好氯霉素衍生物而开发合成的一类新型兽用抗菌药。该药极易溶解于二甲基甲酰胺,溶解于甲醇,稍溶于冰醋酸,微溶于水或氯仿。与其他氯霉素类抗菌药结构相似,作用机理是干扰细菌蛋白质的合成;同时克服了氯霉素能引起骨髓抑制和再生障碍性贫血及伴有血小板减少现象出现的缺点,其抗菌活性明显优于同类氯霉素和当前广泛使用的喹诺酮类抗菌药。因其药物作用特点是抑菌性强、吸收快速、价格适宜,安全性高,特别是无潜在性致再生障碍性贫血发生的可能,对畜禽细菌性疾病治疗效果最佳,可用作饲料添加剂。该药品近年来被普及应用于畜牧业和水产养殖中[2-8]。
氟苯尼考在动物体内药动学与药效直接相关。定量分析方法是研究药动学的重要工具。自从1990年氟苯尼考上市以来,众多学者专家开展与其相关的药物动力学研究,常见国内外文献报道。实验选择研究的对象包括鸡[9]、鱼[10-11]、猪[12]、兔[13]、羊[14]等。在其血浆中,氟苯尼考含量测定的方法也做了相关表述。
Tao等[15]建立了一种化学发光酶联免疫吸附测定法(ELISA)。用于同时检测鸡肉样品中的氟苯尼考和氟苯尼考胺,利用抗原-抗体免疫检测方法计算回收率。孙法良等[16]建立检测氟苯尼考的间接竞争ELISA新方法。抗氟苯尼考(FFC)的高亲和力特异性抗体被制备出。虽然ELISA法检测成本低,特异性强,但需要提前制备标记抗原或标记抗体,操作繁琐,且抗原或抗体质量不稳定,不同批次间会存在较大差异。
胡红美等[17]建立了水产品中氟苯尼考的气相色谱检测法。样品通过乙酸乙酯萃取、正己烷初净化后,再用固相萃取法净化、硅烷化试剂衍生化。Pfenning A P等[18]用气相色谱-电子捕捉检测法同时测定虾肉中的氯霉素类药物及其代谢残留。样品通过萃取剂萃取后,正己烷去脂,再过MCX固相萃取小柱,回收率计算在71.5 %-109.7 %之间。运用气相色谱法进行检测时,必须对样品进行衍生化处理且在这过程要避免水分,在一定程度上增加了样品处理的成本,操作繁琐耗时,这一缺陷限制了该法的应用范围。
谢凯舟等[19]建立鸡肉中氟苯尼考和氟苯尼考胺的荧光同步检测法。提取用丙酮、二氯甲烷,饱和正乙酯除酯,流动相为乙腈和NaH2PO4溶液,荧光检测,回收率在79.3 %-85.6 %。Kowallski P等[20]用高效液相色谱法测定血浆中氟苯尼考含量。采用乙腈-水(25/75,v/v)的比例混合配制成流动相为进样条件。高效液相色谱法不仅准确性高、专属性强、分离效率高、可信度强,而且操作是自动化的,节省了大量......
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