目的：微透析法测定不同浓度的氟苯尼考在鸡体内的血浆蛋白结合率。方法：鸡血离心，分离血浆，将氟苯尼考标准品配制成高，中，低三个浓度的的标准溶液，加入鸡血浆中孵育，准备微透析仪，以及探针半透膜，将探针半透膜浸入鸡血浆中，收集透析液，等梯度倍比稀释，高效液相色谱法检测。结果：氟苯尼考标准曲线各浓度成线性相关，相关系数R2=0.9998，在2.5 μg/mL，氟苯尼考的血浆蛋白结合率平均数为23.67 %，5.0 μg/mL氟苯尼考血浆蛋白结合率平均数54.09 %，10.0 μg/mL氟苯尼考的血浆蛋白结合率平均数为65.99 %。结论：鸡血浆中氟苯尼考血浆蛋白结合率相对较高，药效稳定，药物作用时间长。

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本课题将微透析技术运用于鸡血浆中，在实验初期检索发现，很多实验将氟苯尼考运用于牛，猪，羊，以及水产动物身上，也有运用于家禽身上但多用微生物法或平衡透析法。此次试验即使用新技术运用于鸡血浆中，这一数据对于研究氟苯尼考的药效强弱，作用时间长短具有重大意义。

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定量分析方法

标准曲线建立：根据高效液相色谱仪测定出配制的氟苯尼考156.25 μg/mL -10000 μg/mL浓度的溶液吸收峰面积，在Excel中以峰面积(mAu)为Y轴，浓度(ng/mL)为X轴做线性回归，求出其回归方程及相关系数，并判断线性关系是否良好。对浓度(ng/mL)X和峰面积Y(mAu)进行回归分析，建立标准曲线。

在微透析侧氟苯尼考在鸡体内的血浆蛋白结合率，检测游离药物浓度时使用到的高效液相色谱仪为Waters Symmetry色谱条件为C18(250 mm×4.6 mm, i.d, 5 μm) ，该色谱柱在高效液相色谱仪中流速为0.6 mL/min，色谱柱柱温为32 ℃，每次进样体积为50 μL，在检测氟苯尼考透析液时波长为225 nm。

微透析条件及探针回收率的测定

配制0.5 μg/mL的微透析缓冲液40 mL，即在40 mL的林格氏液中加入200 μg浓度为1000 μg/mL氟苯尼考标准品，将微透析探针半透膜浸入缓冲液，摸索灌流液流速，流速确定为1 μg和2 μg，收集1 μg时间30 min的透析液，稀释，高效液相色谱检测，分析数据，计算探针的相对回收率。

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本课题使用的检测方法为微透析技术。微透析技术的优点在不干扰动物体内其他生命体征以及正常活动的情况下进行在线取样和实时分析，但微透析技术检测游离药物浓度的结果会受到探针半透膜的影响，半透膜的材质，是否完全浸入液面都会对游离药物的浓度产生影响。

出现问题：浓度为2.5 μg/mL和5 μg/mL的氟苯尼考溶液在流速为1μg时与鸡血浆的血浆蛋白结合率，与同组其他相同浓度不同流速的氟苯尼考溶液的鸡血浆蛋白结合率相差较大，甚至血浆蛋白......