高效液相色谱法是现代分离测试的重要手段。因其具有高效性，自动化程度高等优点使其普遍适用于药品、食品、化工等诸多领域。本文旨在介绍高效液相色谱法的有关知识和在蛋白质纯化中的应用，叙述我在丽珠制药厂无菌制造部NGF原液车间，学习使用高效液相色谱技术对蛋白质分离纯化的实习情况。并结合自己在实践中的经历和自己所学的专业知识，对高效液相色谱法在医药行业的应用做出相应的总结和预测。

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色谱法是在1913年由俄国植物学家发现命名的一项分离技术[1]。随着科技水平的不断进步，色谱法也不断进步。高效液相色谱法便是科技进步的产物。相较于普通色谱法，引入气相色谱理论的高效液相色谱法能更好运用于蛋白质纯化工艺，于是便在蛋白质纯化工艺中快速发展起来。目前，由于其高分辨率、高速度、高重复性、自动化等优点。已广泛应用于石油化工、食品安全、医药、商检、法检等领域[2]。

随着分离模式的日益增多，检测器自动化程度的不断提高，再加上各种联合运用技术的出现，高效液相色谱法的发展更加迅猛。其不受试样的挥发性和热稳定性限制，能在室温下应用的优点很好的契合了蛋白质分子不耐高温，遇酸碱容易变形的性质，使其在蛋白质纯化工艺中也越来越广泛。它逐渐成为一种主流的色谱分析方法[3]。现在，利用高效液相色谱法来分离纯化蛋白质、多肽类药物组分越来越普及了，高效液相色谱法逐渐发展成当今蛋白质纯化工艺的主要方法之一。

本人在这次在制药厂实习，实习岗位的工作内容是学习蛋白质的提取分离纯化，通过查找文献学习了很多关于液相和高效液相色谱法的专业知识，在车间实际生产实际操作，在这个过程中学到了不少东西，结合自己在学校学到的专业知识，不仅使个人的知识链更加完善，还以此提高了自己的工作能力，为自己以后走向社会积累了一定的经验，奠定了坚实的基础。通过这次实习让我的视野不在局限于书本，开始变得越来越开阔，思维也不再局限与书本，学会活学活用书本知识。

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通过本次在制药厂无菌制造部NGF原液车间的学习，我充分的掌握了高效液相色谱法的原理及相应仪器的操作规程。我所在的车间生产的是生化制药：从雄性小鼠的颌下腺中提取分离纯化神经生长因子。再加上自己查阅文献、资料等可知，高效液相色谱法作为一种快捷、有效的分离纯化手段，在诸多领域有着极其重要且深远的作用。1、因其具有很好的选择性，自动化程度高，于是应用范围广；2、不受试样的挥发性和热稳定性限制；可通过流动相组分的改变达到高的分离效率，流动相选择条件较宽松；3、一般在室温下分析即可，不需要高柱温，还具有很高的灵敏度，等优点，使其不仅可以做复杂组分的分离，还能进行下一步的定量分析，从而受到医药、食品、化工等领域的使用。在科学技术发展迅速的今天，我相信高效液相色谱法一定能够得到更全面的应用，在各个领域都能得到充分的应用。但是在发展的过程中不可避免的会出现一些问题，但我相信人类的智慧是无限的，不论遇到怎样的困难，科学技术的创新都会使高效液相色谱法在未来成为药用蛋白质、多肽分离纯化工艺的关键技术之一。