定性鉴别结果

黑面神中薄层色谱鉴别参考文献较少,实验难度较大。根据于健东[12]等薄层色谱法鉴别儿茶中儿茶素和表儿茶素文献，用正丁醇-醋酸-水（3:2:1)为展开剂，5%硫酸乙醇溶液为显色剂105℃加热显色时，得到黑面神中表儿茶素的薄层色谱斑点不清晰且拖尾严重。后用甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（70:10:20:0.5）为展开剂，10%硫酸乙醇试液为显色剂时，发现展开距离太短，斑点模糊。经过多次试验摸索最终确定使用甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（70:10:30:0.5）为展开剂，25%磷钼酸乙醇溶液为显色剂，在110℃加热显色，所得结果斑点清晰分离度好。

其余4味药参考文献较多，在参照相关文献并进行预实验后鉴别效果理想，苦参、蛇床子、白鲜皮、地肤子均获得很好的分离效果，薄层斑点清晰，且阴性无干扰。

流动相的选择

经查询2010版《中国药典》，苦参碱的测定是用氨基键合硅胶为填充剂，流动相为乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(80:10:10)；但本次使用的色谱柱为C18柱，用药典的流动相在C18柱子上测定时，出现色谱峰分离度不好，出峰时间早的问题。考虑到最终要测定复方软膏中的两种成分，所以尝试摸索出一个流动相能在不同波长下测得两种成分。经摸索，选用王英晶测定表儿茶素含量时的流动相（甲醇-0.1%磷酸溶液）进行梯度洗脱，苦参碱的出峰时间为10.02min左右，峰型较好，且分离度也高。所以最终选用此流动相来测定软膏中表儿茶素和苦参碱的含量。3.2.3 表儿茶素，苦参碱在同一液相色谱的条件下，经考察，在范围内的线性关系都良好，r都大于0.9998，得到的精密度，重复性和稳定性都很好，平均回收率在90%-110%之间，RSD分别为1.4%，1.5%。由此可得，以表儿茶素和苦参碱为指标成分，可以很好的控制本品软膏质量。

结论 

在本次实验中，所建立的高效液相色谱法，操作流程比较简单，测量的结果比较准确且灵敏度较高，从而产品的质量可以得到稳定的控制，也为复方黑面神软膏的质量标准控制提供一定的依据。