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微透析技术测定氟苯尼考胺在鸡体内的血浆蛋白结合率

[关键词:微透析,氟苯尼考胺,血浆蛋白]  [热度 ]
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作品编号:zygc0109,word全文:12页,合计:6600

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微透析技术测定氟苯尼考胺在鸡体内的血浆蛋白结合率毕业设计论文------

目的:测定不同浓度氟苯尼考胺标准品溶液在鸡体内的血浆蛋白结合率。方法:采集新鲜鸡血,将氟苯尼考胺置于血浆中在37 ℃孵育6 h,以微透析技术进行透析,用高效液相色谱法测定透析液游离态的药物浓度,进行计算,得到氟苯尼考胺在鸡体内的血浆蛋白结合率。结果:氟苯尼考胺标准溶液在78.125-10000 ng/mL范围内的线性关系良好。计算求得所有样品在不同流速时的血浆蛋白结合率,从结果可知高浓度10000 ng/mL的标准样品的血浆蛋白结合率最高,排除掉误差数据,所有数值血浆蛋白结合率的平均值为28.88 %。结论:表明氟苯尼考胺在鸡体内血浆蛋白结合率较低,药物结合率较低说明在体内消除快,同时作用时间短,药物半衰期短,药效有很大的波动,氟苯尼考胺作为氟苯尼考的代谢物,在鸡体内的半衰期短,易被代谢、排泄,表明在氟苯尼考正常时间间隔给药的情况下,氟苯尼考胺在体内蓄积不易引起毒副作用。

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目前研究药物血浆蛋白结合率的方法已经非常成熟。常见的方法有平衡透析法、超速离心法、凝胶过滤法、微透析法[7]、超滤法等,和以光谱学为基础的方法(如高效亲和色谱法等)。此检测样品在实验过程中存在许多无法避免的问题,如实验时样品消耗很大、动物体内干扰条件多、药物浓度低等特点。所以需要找到一个具备实验动物节省,对实验动物机体损伤小、样品洁净、连续采样等优势的检测方法。对于测定方法而言,每种测定方法各有优点与缺点,传统的检测方法如平衡透析法简单、经济,但透析平衡时间长,对血浆和缓冲液pH值要求严格;超滤法易于操作、较为简便、不受稀释效应和体积变化的的影响,但平衡不稳定,很难检测到高浓度的血浆蛋白结合率;微透析技术相对传统的检测方法而言,其最大的优点是可在非平衡条件且在基本不干扰生物样品体内的正常生命活动的情况下进行实时采样和在线分析,在药物研究时,微透析技术已经被广泛应用。影响微透析取样结果的关键因素是微透析回收率,影响微透析回收率的因素有温度、灌流液、灌流速度、药物性质等,但是根据相关文献研究结果表明对微透析线性探针体外回收率的影响不大。微透析技术可以用于测定体外药物的浓度,在实验前对探针的回收率进行摸索,保持在进样过程中实验环境与摸索回收率时的环境一致。可知实验时能避免微透析技术的劣势发挥优势[8-9]。

氟苯尼考(Forfenicol,FF)[10]是一种新型氯霉素类广谱抗生素。比较其他抗生素有多种优点,FF已经广泛使用于动物养殖业中。根据实验结果表明,FF具有胚胎毒性[11]等副作用。氟苯尼考胺(Forfenicol amine,FFA)为FF在机体内的主要代谢物[12],因此通常以FFA作为动物体内FF的残留标志物[13]。FFA作为FF的主要代谢物,FFA与血浆蛋白的结合率能体现药物的蓄积,FFA在动物组织中的残留会严重危害消费者的健康。

本次实验主要是利用微透析技术测定FFA在鸡体内的血浆蛋白结合率。测定方法为高效液相色谱法[14-16],将鸡血浆进行孵育[17],成为含药物的血浆样品。利用微透析进行透析,得到透析液,利用高效液相色谱法得到药物的游离浓度,计算得药物与血浆蛋白结合率。此前未有利用微透析技术测定鸡体内的血浆蛋白结合率的相关文献,微透析作为新兴技术,用于检测血浆蛋白结合率在药代动力学的角度具有重大研究意义。

 

 


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