实验条件的选择

测定波长的选择

通过查阅文献可知天麻素在220nm和270nm波长处皆有最大吸收。从天麻素对照品的光谱图可见220 nm 检测的灵敏度远高于270nm，分析2个波长的峰面积,可知 220nm检测的灵敏度远高于270nm，约为15倍,所以选择220nm作为测定波长。[12]而且虽然天麻素的最大吸收波长在205nm左右，但由于此波长是氘灯的末端发射波长，其能量相对较弱，而且基线噪音也较大，相同的进样量在220nm时得到更大的吸收峰面积，有利于提高定量的准确度。[10]故最终选择220nm作为检测波长。

流动相的选择

在液相色谱中，溶质与流动相和固定相两者之间相互作用的强弱程度将决定溶质的保留，所以流动相的选择对物质的分离作用极为重要。在众多的参考文献中使用过的流动相有乙腈-0.05％磷酸溶液（3:97）、甲醇-0.001mol/L、磷酸盐溶液（2.5:97.5）、甲醇-磷酸盐溶液（含KH2PO4和Na2HPO4各为0.1mol/L）-水（1.5:3:95.5）、乙腈-水（3：97）、甲醇-异丙醇-水（2.5：2.5：95）、水-甲醇（93：7）。[13]比较药典与本实验所提供的流动相, 结果均可获得良好的色谱图，在了结合以上信息及条件之后，本实验所采用采用乙腈-0.05%磷酸溶液（3：97）溶液的流动相经过系统适应性实验，有良好的分离效果，所以以此流动相。提取的样品用流动相溶解后进样, 避免出现前倾峰。

提取方法的选择

实验过程中不同的提取方法对天麻素的含量测定也有一定的影响，根据文献[13]超声法：无需加热，操作简便，可以将样品更为有效的粉碎，但其过程所产生的噪音较大，且仪器各部位功率有一定的差异，对提取结果有一定的影响。回流法：提取率较高，但其操作复杂、所需时间长、耗能也大，且有一定安全隐患。微波法：操作简单、所需时间较短、耗能小、无污染，但为了避免其受热不均匀以至于影响结果，实验必须逐个操作才可以保证提取效果，且要注意加热时间不能过长，以免溶液沸腾而冲出。应采用间断多次加热的方法来进行提取。索氏法：提取效果较好，但装样较为复杂、耗时较长、耗能较大。结合2015版文献和实验室条件，最终选择超声法进行实验，该法操作简便，快速，有利于进行多次实验。

影响天麻素含量的因素

时间：人工天麻的通常在当年的10月下半月到下一年的4月之间进行栽培。一般在10月下半月至12月上半月在土壤表面结冻之前播种，或者在下一年春季3至4月在土壤解冻之后播种，前者称为冬栽，后者为春栽。在一些高海拔山区可以到5月再进行播种。 一般来说，冬天麻的质量比春天麻好。

场地：人工天麻可以任意选择住房的附近、小山丘、树林果园等地方的田地作为栽培的场所，最好选择透气渗水的沙质土壤来进行栽培。因为天麻喜好在一些含有较厚的腐殖质、疏松透气的土壤中生长发育，具有良好的排水性能和土壤结构能更有......