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多杀菌素高产菌株的航天诱变选育

[关键词:多杀菌素,高产菌株]  [热度 ]
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作品编号:zygc0290,word全文:24页,合计:10000

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多杀菌素高产菌株的航天诱变选育毕业设计论文------

多杀菌素又名多杀霉素(Spinosyns),是在刺糖多胞菌(Saccharopolyspora spinosa)发酵液中提取的一种大环内酯类无公害高效生物杀虫剂。多杀菌素具有生物农药的安全性,化学合成农药的速效性,对哺乳动物、昆虫天敌、环境无害和独特的作用机理等优点,使它在防治储粮虫害和田间虫害上具有良好的应用价值和广阔的市场前景。本文通过航天诱变选育出多杀菌素突变株,用96孔板初筛和摇瓶发酵培养基复筛的方法,并通过HPLC测定多杀菌素含量,来获得多杀菌素遗传稳定高产菌株。

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本文研究目标和思路

根据以上文献综述,可以得到以下结论:

1. 多杀菌素是一种崭新的农用抗生素,它的优秀特征包括:独特的化学结构和作用机制,对影响经济的害虫存在极高的活性,半衰期短,降解完善,对哺乳动物、鸟类、鱼类甚至大多数益虫具有宽广的安全界限。多杀菌素对继续利用天然产物开发生命科学新产品来说可谓意义非凡。在国内,目前对该产品的应用还依赖于进口,因此抓紧对多杀菌素的开发研究,具有巨大的社会效益和经济效益。

2. 关于多杀菌素的合成机理、药理作用和生物活性等方面已经展开了一些研究工作,但还不够成熟,而且相关的研究成果均已申请了专利保护。关于多杀菌素菌种选育和发酵条件方面的研究也比较缺乏,公开发表的文献很少。本文主要研究目标是通过航天诱变选育,获得多杀菌素高产菌株,提高多杀菌素的摇瓶发酵水平。 

基于以上的文献综述和相关结论,在本论文中将展开如下几个方面的研究工作:

1. 确立多杀菌素的高效液相色谱分析方法。

2. 通过航天诱变,对出发菌株进行初筛和复筛循环交替验证,以获得多杀菌素遗传稳定高产菌株。

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实验结论:

1.从四批总的的结果来看,效价在200μg/ml以上的有240株,占总数量的10%左右,及正突变率约为10%,符合常规诱变一般规律。但是航一有17株,正突变率仅占3.6%;航二12株、仅占2.5%;航三163、约占17%;航四48株、约占10%。下一步准备选取航一、航二和航四中效价大于200μg/ml及航三单位较高的前100株进行复筛。

2.产量高于300的菌株即最高产的三个菌株分别在航一的2-E1(351μg/ml)和航三的18-E4(318μg/ml)及航四的22-D12(308μg/ml)。

3.重点关注18-C1(283.04μg/ml),其在1min左右处出现一个较大的物质峰,可能为产生的新物质,另外10-D7、11-A3、11-A12均在2.6min处出现一个较高的物质峰,他们均不产生多杀的A和D组分。

 

 


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