目的：发酵法对大黄中蒽醌含量影响的研究。方法：采用微生物发酵即酵母菌发酵的工艺对大黄进行发酵，利用醋酸镁-甲醇比色法进行对大黄发酵前后蒽醌类物质含量的变化研究。结果：发酵后大黄中游离蒽醌的含量明显增多，总蒽醌的含量有稍许降低。所以大黄用发酵法炮制，此方法是可行的。

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总蒽醌含量测定

取生大黄、发酵大黄提取液2ml分别置于50ml烧杯中，在恒温水浴锅上蒸干甲醇，然后分别加入2mlH2O，搅拌使其充分溶解，加入1ml已配置好的40%FeCl3·6H2O，100℃水浴锅中加热20min后加入混合酸（冰醋酸：25%HCl=10:2）2ml水浴1h后快速冷却，置于分液漏斗中，再加入15ml氯仿萃取，得到氯仿层，再加入10mlH2O分别冲洗3次直至将氯仿层中的酸完全洗净后，在恒温水浴锅上蒸干氯仿，最后加入少量0.8%醋酸镁-甲醇溶液溶解后转移至10ml容量瓶中定容。以显色剂为空白对照，在波长为500nm处测出吸光度，带入线性回归方程中曲线中，计算出浓度[13-15]。

游离蒽醌含量的测定

取生大黄、发酵大黄提取液分别5ml至50ml烧杯中，在恒温水浴锅上蒸干甲醇，然后分别加入5mlH2O搅拌至完全溶解，置于分液漏斗中，再分别加入15ml氯仿萃取，蒸干氯仿，加入0.8%醋酸镁甲醇溶液溶解转移至10ml容量瓶中定容，以显色剂为空白对照，在波长500nm处测出吸光度，带入线性回归方程中计算出浓度。

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总结

固然现在对于发酵大黄的研究比较少，可是通过此次实验数据可表明发酵法炮制大黄对其中总蒽醌量几乎是无影响，而对结合型蒽醌的含量是有明显降低的，有效成分游离型蒽醌含量增加，从而减少了泻下、腹痛、恶心等副作用，游离型蒽醌类物质的增多，对其功效也有一定程度的增加，所以发酵法用于大黄的炮制是可行的。

讨论

测定总蒽醌和游离型蒽醌含量时，酸和水是重要因素，如果其中含有酸或水，则会使测出的吸光度结果偏低，从而使含量测得偏低。原因是蒽醌类物质与醋酸镁结合形成的络合物，酸和水会降低络合物的稳定性，从而使吸光度偏低，产生实验误差。所以在该实验中必须保证在加入0.8%醋酸镁-甲醇前一步操作中不得带入水，酸也要除尽。

在本次做薄层色谱的实验中，第一次数据失败是由于硅胶板未在层析缸中平衡，第二次实验，也就是本次实验结果，生大黄只显示了四个点，本应该是五个点，明显的是最上面的点都没有显示出来，可能的原因是所取的展开剂量的太少，应该加大展开剂的量；也有可能是展开剂的性能不是很强，需要更换展开剂或者是改变展开剂的比例。虽然此次结果不是很理想，但是还是能够呈现出生大黄中有一部分物质是经过发酵之后被转化成其他物质了。

本实验中0.8%醋酸镁-甲醇溶液作为显色剂。原因是由于该物质中蒽醌的含量还是相对较少的，使得蒽醌类物质本身的吸收峰不是很强[16-18]。选择......