本文主要是通过实验验证IDH1的基因抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖和侵袭存在影响，并且抑制IDH1上的特定基因可以抑制胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭。通过构建3条IDH1-shRNA来抑制IDH1基因表达，并在细胞水平上检测抑制效果最高的进行后续实验。研究和观察抑制后的IDH1对胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭的影响。实验结果表明，抑制IDH1后对胶质母细胞瘤细胞的增殖和侵袭存在促进作用。

讨论

目前关于IDH1与胶质瘤的关系国内外有许多的专家学者都在研究，并且取得一定成果。胶质瘤的发生与发展是多种因素多阶段综合性的过程。伴随着各学科的快速发展及检测手段的日新月异，使研究者得以从各个角度分析胶质瘤组织内蛋白、基因[16]。并且，IDH1的抑制与GEFR/PI3K/AKT/mTOR通路中的相关蛋白表达质粒存在关系。有研究表明，PI3K-AKT信号传导通路是可以通过多种途径抑制细胞凋亡，进而促进细胞存活的[17]。PI3K可以让肿瘤细胞对化放疗药物产生耐药性，保护肿瘤细胞[18]。不仅如此，还有实验验证得到，PI3K/AKT信号通路一旦激活，将会让AKT水平显著升高，并进一步促进肿瘤细胞增殖[19]。深入研究胶质瘤中PI3K/AKT/mTOR信号传导通路的有助于我们进一步了解胶质瘤的发生发展的分子遗传学机制[20]。因此，抑制IDH1基因是否同样可以对胶质母细胞瘤细胞的增殖与侵袭起到抑制作......

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目的：探讨shRNA抑制IDH1基因对人胶质母细胞瘤细胞增殖与侵袭的影响。方法：设计合成的三条shRNA并构建慢病毒质粒，在细胞水平上抑制IDH1表达并检测效果。选择抑制效果最强的进行后续功能试验。用293T细胞进行慢病毒包装并感染胶质母细胞瘤 U87MG,采用划痕及MTT实验检测细胞增殖以及侵袭的影响。 结果：shRNA抑制IDH1基因对人胶质母细胞瘤细胞U87MG的增殖与侵袭起到了促进作用。

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细胞复苏

在水浴锅中加热大半杯双蒸水到37℃至42℃之间，加热水浴锅的同时，准备好所需的试验材料放入超净工作台上。再从冰箱中取出含冻存的细胞冻存管，立即用镊子夹住投入到水中，并且手握烧杯不断快速的轻轻摇晃，使细胞解冻。待完全解冻后，取出冻存管用抹布擦干，喷洒酒精后放入超净工作台。用移液枪将细胞从冻存管中吸出加入到含有10%血清的培养瓶中，然后用“十字”法将细胞摇匀，使细胞与培养液充分接触，获得良好的生长。最后将培养瓶放入三气培养箱。 

细胞换液

从培养箱内取出培养皿置于超净工作台，培养瓶用抹布擦干，喷酒精后放入超净工作台。解开培养瓶的封口膜，用酒精灯绕着瓶盖口烧一圈，然后打开瓶盖再烧一圈。吸出原培养液，并弃去。然后换枪头吸取1ml无糖培养液贴皿壁缓慢添加。不换枪头吸出皿中培养液弃去。重复添加弃去二到三次，使皿中原有含糖的培养液被彻底清洗除去。然后在添加3ml的无糖培养液于皿内，然后轻微摇晃，使培养液在皿中分布均匀。最后......