水蛭炮制工艺优选结果的分析与评价

由星点设计-效应面法的结果可知，本实验优选出的烫水蛭的最佳工艺为：烫制温度为172℃、烫制时间为5 min、滑石粉用量为29%。Design-Expert的分析结果显示，烫制温度是影响水蛭粉碎率和抗凝血酶活性的最大因素，烫制时间为次要因素，醇溶性浸出物受温度和实验的影响不显著。这一结果与前言提到水蛭是复杂的蛋白质混合体相印证，水蛭素是水蛭中抗凝血活性极强的蛋白质，因此，温度越高，炮制时间越长，水蛭素的损失越大，越不利于水蛭的质量。水蛭的炮制以矫正气味、便于粉碎、降低毒性为主要目的，其炮制工艺应在达到炮制目的的同时最大限度地减少有效成分的损失，以保证水蛭的疗效，因此生产中应在能达到便于粉碎目的的温度范围内选取较低温，以保证水蛭素的活性，这揭示的也是本次实验结果的内涵，也体现了炮制可以使水蛭药性缓和、毒性降低的机理。Design-Expert的分析结果表明，滑石粉的用量对水蛭炮制的质量没有显著性影响，即影响小。三个因素之间互相影响，综合三者的影响， Design-Expert优选出了最佳工艺。

操作的注意事项

本实验的主要操作为对生水蛭进行炮制、测定制水蛭的粉碎率、醇溶性浸出物、抗凝血酶活性。这四大部分的操作，都关系着整个实验的进度和最终的结果的可靠性。在对水蛭进行炮制时，由于炒药机降温困难，所以炮制时应先烫制所需温度较低的组别，之后烫制温度较高的组别，使先后炮制的组别呈现温度由低到高的趋势，以此秉承环保意识，提高炮制效率，增强能量的利用率。测定制水蛭的粉碎率时 由于高温炮制后的水蛭质地较脆，若操作不合理，容易造成水蛭细粉飞扬，增大结果的偏差，因此，在粉碎后，必须等到粉碎机完全冷却后再在无风处轻轻打开盖子，过筛时避免用力过猛。测定水蛭的醇溶性浸出物时，由于是定量实验，所涉及的每一个步骤都要确保有效物质不损失或有效物质的损失达到最小，使用移液管量取25 mL浸出物时，应选择好管口没有破损的干净移液管，移液管放出液体后应观察移液管是否存在挂壁现象，若有，则应换移液管重新吸取。从烘箱取出后要及时放进干燥器，应提前将干燥器准备好放置于烘箱旁，干燥结束后立即将蒸发皿放入干燥器。测定抗凝血酶活性时，0.5%牛纤维蛋白原的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液和凝血酶溶液容易变质，应现配现用，由于牛纤维蛋白原不易溶解，配制溶液时应37℃水浴中促进溶解，溶解时温度过低会溶解困难或导致蛋白质变性。只有将以上每一个步骤都做好，才能保证实验的准确性。