影响可溶性砷含量的因素

影响可溶性砷提取含量的因素主要有：提取溶剂和提取方式、提取时间和温度等。不同基质中可溶性砷形态化合物的提取没有统一标准，需要考虑各方面因素。为了保证结果的可靠性和准确性，应采用多种提取方法。

提取溶剂和提取方式

在利用HPLC进行分离时，样品处理过程中加入的所有离子、化合物，在色谱分离过程中，都可能通过影响流动相离子与离子之间，及流动相离子与固定相之间的界面，从而对分离效果产生影响；而且这些离子还会可能与流动相的离子竞争试剂或与固定相表面试剂离子置换； 加入的酸性离子或碱性离子甚至会影响更为复杂的酸碱平衡[22]。 

由表8可知，不同的提取溶剂及提取方式，提取出来的可溶性砷含量占总砷含量百分比相近。说明甲醇超声提取与模拟人工胃液振荡提取两种方法的提取效率相近。将4.3项下各可溶性形态砷化合物含量相加，再与4.2项下可溶性总砷含量相比，得表9。从表9可以看出，两种方法提取Y3、Y5全部可溶性砷形态化合物占可溶性总砷含量百分比相差较大，说明不同提取方法对各可溶性砷形态化合物提取含量有影响。

另外，甲醇会影响色谱分离效果，导致峰形扭曲失真，且甲醇会提高As的离子化效率，增强75 As的信号[23]。甲醇-水提取需要氮吹去甲醇化，尽量去除样品提取液的甲醇，但氮吹过程可能会吹至过干，因此甲醇-水超声提取方法难免造成部分砷形态化合物的损失[24]。

提取时间和温度

聂黎行[25]等研究表明，牛黄消炎片经人工胃液振荡提取8 h后，可溶性砷含量基本稳定。一般混合性食物由胃排空的时间约4~6小时，考察人工胃液提取效果只需6 h即可，温度模拟人体正常温度37℃。

本次实验中，采用甲醇超声提取方法提取样品中可溶性砷，空白加标回收率为为As（Ⅲ）：94.69%，As（Ⅴ）：95.97%，且根据表8对比两种方法提取出来的可溶性砷占总砷含量百分比，可看出甲醇超声提取法与模拟人工胃液振荡提取法的提取效率相当，说明20℃超声30min的条件下，甲醇超声提取法在是一种有效、省时的提取方法。

不同制剂中雄黄可溶性砷形态分析

本次购买的样品Y1~Y6中，所包括的剂型有：丸剂（Y1、Y2），片剂（Y3），散剂（Y4、Y5、Y6）。所有样品中只检测出As（Ⅲ）和As（Ⅴ）两种形态。除Y5外，其他不同剂型的样品中，毒性较高的As（Ⅲ）含量比As（Ⅴ）含量......