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枸芪片对小鼠体液免疫和非特异性免疫功能影响的实验研究

[关键词:枸芪片,非特异性免疫]  [热度 ]
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作品编号:zyx0058,word全文:16页,合计:7000

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枸芪片对小鼠体液免疫和非特异性免疫功能影响的实验研究毕业设计论文------

目的 探究枸芪片对小鼠体液免疫和非特异性免疫功能的影响,为指导临床用药提供实验依据;方法 实验分为三部分,每部分均使用60只雄性KM小鼠,体质量18-22g,按体质量随机分成5组,即生理盐水组、左旋咪唑阳性药物组、枸芪片低、中、高3个剂量组(3.85、7.7、15.4 g生药/kg),每组12只。枸芪片各剂量组、左旋咪唑阳性药物组及生理盐水组每只动物每日给予相应剂量的溶液,灌胃容积为20 mL/kg,每日1次,连续给药21 d。21d后取样测定小鼠各项免疫指标,包括对小鼠脾脏指数和胸腺指数、小鼠血清中溶血素抗体含量、巨噬细胞吞噬指数α和吞噬速率k;结果 枸芪片能增加小鼠免疫器官重量,增强小鼠体液免疫功能,以及对单核-巨噬细胞吞噬功能有上升趋势;结论 枸芪片对正常小鼠的体液免疫和非特异性免疫有增强作用。

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枸芪片对小鼠免疫器官的影响

取雄性KM小鼠60只,体质量18-22 g,按体质量随机分成5组,即生理盐水组、左旋咪唑阳性药物组、枸芪片低、中、高3个剂量组(3.85、7.7、15.4 g生药/kg),每组12只。枸芪片各剂量组及左旋咪唑阳性药物组每只动物每日给予相应剂量的药物,灌胃容积为20mL/kg,生理盐水组则给予等体积生理盐水,连续给药21 d。于实验结束时小鼠称重,脱颈椎处死小鼠后取脾脏、胸腺,称湿重。

......

枸芪片对小鼠体液免疫功能的影响(血清溶血素的测定)

动物分组及给药方法同“3.1”。于15 d时,每只鼠腹腔注射2%(v/v)的SRBC细胞悬液0.2mL。5 d后小鼠内眦静脉丛取血于离心管内,放置约1 h,将凝固血与管壁剥离,使血清充分析出,2000 r/min离心10min,收集血清。用生理盐水将血清倍比稀释,将不同稀释度的血清分别置于微量血凝实验板内,每孔100μL,再加入100μL 0.5%(v/v)的SRBC悬液,充分混匀,装入湿润的平盘内加盖,于37 ℃温箱孵育3 h,观察血球凝集程度。

通常情况下,血清凝集程度可分为5个级别(0—Ⅳ),具体分级情况如下:

0级 红细胞全部下沉,集中在孔底部形成致密的圆点状,四周液体清晰。

Ⅰ级 红细胞大部分沉集在孔底形成圆点状,周围有少量凝聚的红细胞。

Ⅱ级 凝集的红细胞在孔底形成薄层,中间可以明显见到一个疏松的红点。

Ⅲ级 凝集的红细胞均匀地铺散在孔底形成一薄层,中间隐约可见一个小红点。

Ⅳ级 凝集的红细胞均匀地铺散在孔底形成一薄层,凝块有时可到卷折状。

按下列公式计算抗体积数。其抗体水平=(S1+2S2+3S3.......nSn)。式中1、2、3....n代表对倍稀释的指数,S表示凝集程度的级别,抗体积数越大,表示小鼠体内血清抗体水平越高。

枸芪片对小鼠单核—巨噬细胞功能的影响(小鼠碳廓清实验)

动物分组及给药方法同“3.1”。末次给药1 h后,每只小鼠尾静脉注入印度墨汁(用生理盐水稀释3.5倍,临用前现配制),注入印度墨汁的量按小鼠空腹体质量计算,0.1 mL/10 g。注入墨汁后2 min(t1)和10 min(t2),分别从小鼠內眦静脉丛取血20μL,立即注入2 mL 0.1% Na2CO3 溶液中,吹打混匀。于600nm波长处测光密度值(OD),以Na2CO3溶液作空白对照。两次采血完毕之后脱颈椎处死小鼠,取脾脏.......

 

 


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