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多因素复合法制备的气虚发热大鼠模型免疫功能的变化研究

[关键词:多因素复合法,免疫功能]  [热度 ]
提示:此毕业设计论文完整版包含【论文,文献综述
作品编号:zyx0055,word全文:16页,合计:8200

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多因素复合法制备的气虚发热大鼠模型免疫功能的变化研究毕业设计论文------

目的 综合评价多因素复合法制备的大鼠气虚发热模型免疫功能的变化。 方法 采用限食+番泻叶泻下+游泳劳倦过度复合法建立大鼠脾气虚证模型,注射脂多糖(LPS)复制气虚发热模型,根据其表征变化、血常规分析、血清D-木糖检测等指标评价该模型;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清IgM、IgG、C3水平,观察该模型免疫功能的变化。 结果 造模期间复合组大鼠体重下降,白细胞数、淋巴细胞数较对照组均显著降低(p<0.05),D-木糖吸光度值显示小肠吸收功能减弱,具显著性差异;脾脏组织存在一定程度的损伤。在注射LPS后6个小时内,气虚发热组、发热组体温与正常组间存在极显著差异(p<0.01),发热组的发热峰值高于气虚发热组。气虚组、气虚发热组的C3水平略有下降,IgG水平显著下降(p<0.05),各模型组的NK细胞含量显著性上升(p<0.05)。 结论 以多因素建立的模型符合中医脾气虚症候,且该模型表现出免疫功能紊乱,机体发热可使IgM水平升高,但会加大IgG水平下降。

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脾脏功能测定方法

D-木糖吸收实验后每组各取6只大鼠脱臼处死,取出完整脾脏与胸腺,去掉筋膜及脂肪组织,用电子分析天平称重。脾脏指数=脾重/体重(mg/g);胸腺指数=胸腺重量/体重(mg/g)。脾脏用15%甲醛固定,制作HE染色病理组织切片。

气虚发热模型建立及免疫分子含量检测方法

取复合组、正常组大鼠分别6只腹腔注射LPS(80μg?kg-1)为气虚发热组与发热组,即设复合模型组、正常组、气虚发热组和发热组,四组大鼠隔0.5h测一次肛温,连续检测6h。并在乙醚麻醉状态下采用眼眶静脉取血2mL,静置20min,3000 r/min离心10min ,取血清,-80℃保存备用,按试剂盒说明书采用酶标仪检测IgG、IgM、补体C3、NK细胞含量。

统计方法

所有计量资料以均值±标准差(x±s)表示,多组间均数的比较采用单因素方差分析。若方差齐,组间均值两两比较采用SNK法;若方差不齐,组间均值两两比较采用Dunnett T3法。采用IBM SPSS 21.0统计软件进行统计。

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体质量及行为学分析

如图1所示,在造模期间,模型组大鼠均出现毛发稀松不顺,缺乏光泽,脱毛量增多;尾巴、脚爪苍白,少血色,较瘦;体型消瘦,两侧腹部凹陷,弓背,粪便溏稀;且有精神不振,食量减少,喜扎堆,好静倦卧等现象;而正常组大鼠的体重增长稳定,比较活跃,皮肤裸露处呈粉红色、有血色,毛发有光泽。

图2为造模期间各组大鼠的体重变化曲线,可看出对照组和复合组大鼠的体重有明显的变化,其中对照组大鼠体重不断增加,且增长稳定;复合组的大鼠在造模初期不断下降,在造模后12天后体重开始稳定。表1为两组大鼠体重增量差异,对照组大鼠的体重不断增加,而模型组体重持续下降(P < 0.001)。

 

 


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