研究目标

本研究采用固相萃取法处理血浆样品，采用高灵敏度的UPLC-MS/MS法检测附子中次乌头碱的含量，从而建立附子中次乌头碱在比格犬体内药动学研究的方法，为附子临床治疗与安全应用提供很好的参考依据。

主要特色

（1）采用高灵敏度的UPLC-MS/MS 法检测附子中次乌头碱的含量；

（2）采用固相萃取法处理血浆样品。

目的：研究口服制附子煎煮液后次乌头碱在比格犬体内的药动学特征。方法：口服给予比格犬附子煎煮液后，前肢静脉取血， 利用固相萃取法处理血浆样品，采用UPLC- MS/MS 分析方法检测次乌头碱的血药浓度。药时数据用DAS药代动力学程序计算主要药动学参数。结果：次乌头碱在0.1~1000.0ng/ml （r=0.9998）范围内呈良好的线性关系，平均提取回收率在87.1%以上。次乌头碱的血药浓度-时间曲线符合一室模型。结论：本实验建立的用于检测次乌头碱血浆浓度的UPLC-MS/MS分析方法，其灵敏度高、专属性强、稳定性好，能很好的符合生物样品分析的要求，为临床治疗和安全的应用提供了很好的依据。

实验方法验证

由于附子生物碱在体内代谢迅速，半衰期短, 血液中不易检测出，故本实验选取血浆作为生物样本，首次应用液质联用法测定次乌头碱在比格犬体内的药代动力学过程，本方法实用性强，对附子临床治疗与安全应用可以提供很好的参考依据。

超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术

利用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术，仅通过保留时间与精确 m /z 值即可对次乌头碱进行定性分析，通过次乌头碱与内标物的峰面积比，采用标准曲线法即可对附子中次乌头碱在比格犬血浆中的含量进行测定。其灵敏度高、专属性强、稳定性好， 能很好的符合生物样品分析的要求。

结论

与其他含量测定方法相比较，UPLC/MS/MS法具有以下优点：（1）灵敏度高，定量下限是0.1ng/ml，检测下限是0.05 ng/ml；（2）专属性强；（3）所需样本量小；（4）分析速度快。

次乌头碱在0.1~1000.0ng/ml （r=0.9998）范围内呈良好的线性关系，平均提取回收率在87.1%以上。次乌头碱的血药浓度-时间曲线符合一室模型。

本实验建立的用于检测次乌头碱血浆浓度的UPLC-MS/MS分析方法，其灵敏度高、专属性强、稳定性好，能很好的符合生物样品分析的要求，为临床治疗和安全的应用提供了很好的依据。