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地龙抑菌作用初步研究

[关键词:地龙,抑菌作用]  [热度 ]
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作品编号:zygc0286,word全文:18页,合计:9500

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地龙抑菌作用初步研究毕业设计论文------

目的:采用不同的处理方法对赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)进行处理。将得到的提取物进行抑菌实验并观察抑菌效果。方法:从自然环境中采集菌株并分离得到纯种菌株。采用鲜品直接匀浆、纯水浸泡后匀浆、水浴处理、提取吐出物四种处理方法制备赤子爱胜蚓样品。用纸片法和打孔法考察四种赤子爱胜蚓样品抑菌作用。结果:从外界环境中分离得到的白色念球菌、青霉菌、黄曲霉菌、红曲霉菌。进  行纸片抑菌实验,发现浸泡后蚯蚓直接匀浆提取物对白色念球菌有明显抑制效果。庆大霉素的抑菌圈直径为 38.6mm,浸泡后蚯蚓直接匀浆抑菌圈直径为 28.3mm,稀释 10 倍后抑菌圈直径为 8.7mm,稀释 100 倍后抑菌圈直径为 5mm 即基本无抑菌效果。结论:纯水浸泡后匀浆处理的蚯蚓提取物对白色念球菌有抑菌作用,将提取物稀释 10 倍后抑菌作用明显下降,稀释 100 倍后几乎无作用。

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地龙抑菌作用初步研究的立题依据

当今社会抑菌药物大量普及,已经导致许多微生物拥有了不同程度的耐药性。抑菌药不仅会增加细菌耐药性,而且会对人体造成一定的不良影响。但对于抗菌肽类抑菌药物则没有上述问题,其作用机理是药物直接和有害菌的细胞壁、细胞膜及胞质内的靶目标结合,不需要和受体结合,所以细菌很难产生耐药性。现代医学研究表明地龙具有很好的抗炎和抑菌作用,本论文将从地龙的抗菌性方面入手,为地龙抗炎机制的研究奠定基础。此外地龙在我国分布范围较广,在辽宁大连亦有分布,取材便利, 天然活性产物提取分离实验室为地龙的粗提提供了保障,纸片法和打孔法研究抑菌效果,方法成熟,地龙的抗炎效果已有报道,为抗菌研究打下了理论基础。

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培养基配置

在菌种采集前应先配置所需的培养基。其配置流程如下述:

(1)每 1000ml 水中加入 3g 牛肉膏、5g 蛋白胨、17g 琼脂、10g 氯化钠。根据配方称取牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠,之后向锥形瓶内加倒入一定量的无菌水, 将称取物质逐一加入并全部溶解,再将剩余的无菌水加入到瓶中。在升温过程中,先将上述配置完成的液体加热至沸腾,之后加入定量称取的琼脂,持续升温至琼脂完全融化,并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦。

(2)用玻璃棒蘸取加热后的培养液滴到(5.5-9.0)PH 试纸上测培养基的PH 值, 若 PH 高于或低于 7.2,则可用 1mol/L 的HCl 或 1mol/L 的NaOH 进行调节,调节到所需要求的 PH 值为止。

(3) 在加热完毕后,用纱布堵住瓶口。塞住瓶口可以防止空气中的杂菌进入, 达到避免污染的效果。制作瓶塞时,要根据瓶口大小裁剪合适大小的纱布,将纱布多次对折达到 16 层时方可进行瓶塞制作,之后将纱布铺在锥形瓶瓶口圆孔中,用右手食指插入纱布中部,同时将纱布下瓶口内部下按,在将瓶口周围的纱布向瓶口内部顺时针卷折塞入瓶口。瓶塞作成后,瓶塞应与锥形瓶瓶口内壁紧密贴合,以防止空气中杂菌污染培养液。使瓶塞的 2/3 在瓶内,并在瓶外留出一定的纱布。盖上纸片并用细绳缠绕捆扎,准备灭菌。

(4)将准备好的锥形瓶置于高温灭菌锅内在 121℃灭菌 15 分钟以上。

(5)从灭菌锅中取出锥形瓶和玻璃平皿放在超净台上,并将酒精灯点燃,一手握住锥形瓶,另一只手拔开纱布制作的瓶塞,将锥形瓶瓶口在酒精灯外焰上转动过火, 达到灭菌效果,并打开玻璃平皿的上盖,迅速在玻璃平皿中加入适量的培养液。当液体达到培养皿 1/3 高度后停止。将倒好的培养皿放在阴凉处等 10 分钟左右待培养皿内液体完全凝固,将培养皿的玻璃上盖盖上,倒置放置,将培养皿放入培养箱内,24 小时后观察平皿上是否长有杂菌,若无则.......

 

 


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