3种卟啉粗产物提纯

取少量粗产物(①5,10,15,20-四(4-羟基苯基)卟啉(THPP)；②5,10,15,20-四(4-甲氧羰基苯基)卟啉(TPPCOOMe)；③5,10,15,20-四(4-羧基苯基)卟啉(TCPP)：溶于乙酸乙酯，通过薄层色谱法(TLC)确定洗脱剂(石油醚:乙酸乙酯)体积比(如表3-1、3-2、3-3所示)。后选用外径3.5cm，柱高30cm的玻璃层析柱，用200～300目的柱层析硅胶干法装柱约10cm，干法上柱，过柱。收集目标产物洗脱液(验证方法：所收集洗脱液在365nm紫外-可见光下显红色荧光)在40～45℃下旋转蒸发，得初步干燥产物。取少量溶于乙酸乙酯，通过紫外-可见光谱(扫描范围：800.0～300.0nm，扫描间隔：0.1nm)初步断定产物纯度。如若紫外-可见光谱图出现多重尖锐细峰，则重复以上操作直至产物的紫外-可见光谱在300～800nm呈光滑图谱，且在350～400nm处的特征吸收峰无锯齿状精细结构。

从图4-3、4-4中可知无论是THPP的Soret带还是Q带，最大紫外吸收强度皆随芦丁的量增大而降低；TCPP的Soret带呈现出波浪形的增减，但是Soret带还是Q带整体都呈下滑的趋势；而TPPCOOMe的Soret带和Q带的最大紫外吸收强度皆随芦丁的量增大而增强，在加入0.5mL芦丁标准液后有吸光度降低的趋势。

所以，无论是THPP、TCPP还是TPPCOOMe，它的紫外吸收强度都随芦丁的加入而变化；即是说芦丁能影响实验中三种卟啉荧光探针的紫外检测，根据影响是相互的可得出结论：芦丁的紫外检测能受到实验中三种卟啉荧光探针的影响。

讨论

在本次实验中，之所以选择Adler-Longo法合成THPP，其中有几方面的原因。实验条件：反应物中对羟基苯甲醛，吡咯皆是实验室中常见药物。加热设备及冰箱，制冰机等也是实验室中常见设备。实验环境：该实验对实验环境要求并不苛刻，120℃加热及冰浴之类的简单要求可以轻松达成。总的来说, 通过醛类化合物与吡咯的缩合环化得到四苯基卟啉的方法合出产物的杂质较少，反应条件简单，适合实验室制备级合成。

加入的芦丁标准溶液/加入的卟啉标准溶液=50uL/3mL=1.67%≤3%，对体积的影响可以忽略不计。因此卟啉标准溶液浓度变化也可以忽略不计，实验结果排除卟啉浓度变化的影响。此外，查阅文献可知芦丁的紫外吸收波长在400nm以内，对卟啉的Soret带和Q带皆不会产生影响。至于该实验中卟啉荧光探针所相应的机理不明，疑似EET机理。

Lin课题小组合成了第一个通过比率荧光识别钴离子的探针P-7，其中机理是钴离子与荧光探针的络合有效的调控了香豆素和卟啉之间的EET效率，从而引起了香豆素的荧光发射峰增强和卟啉的荧光发射峰减弱，这种机理为卟啉荧光探针设计开辟了一个崭新的领域。在此成功例子之后相信越来越多的目光会聚焦到卟啉荧光探针对中药化学成分的检测上。对实现中药化学的定性定量检测具有重大的突破性意义。