乙酰半胱氨酸对雷公藤内酯肝毒性的影响研究
[关键词:乙酰半胱氨酸,雷公藤内酯肝] [热度 ]提示:此毕业设计论文完整版包含【论文】 作品编号:zygc0307,word全文:26页,合计:14000字 |
目的:采用MTT比色法和台盼蓝染色法测定雷公藤内酯(triptolide,TRI)联合乙酰半胱氨酸(N-acelylcysteine,NAC)对人L02肝细胞增殖的影响。方法:采用MTT法检测雷公藤内酯(浓度分别是:0、1、2、5、10、20ng/ml)、乙酰半胱氨酸(浓度分别是:0、0.0625、0.125、0.25、0.5、1mmol/L)单药以及两药合用对L02肝细胞的生长抑制作用,用酶标仪测定各药物浓度下细胞培养液的吸光度,根据吸光度计算出吸光度均数标准差(SD)及细胞生长抑制率,分别将各个浓度药物单用和药物合用的吸光度均数标准差(SD)进行t-检验:平均值的成对二样本分析,根据P双尾<0.05来判断两平均值之间是否有显著性差异,从而探究雷公藤内酯联合乙酰半胱氨酸对细胞增殖的影响;采用台盼蓝染色法测雷公藤内酯(浓度分别是:0、5、20ng/ml)、乙酰半胱氨酸(浓度分别是:0、0.25、1mmol/L)单药以及两药合用对L02肝细胞的生长抑制作用,用倒置显微镜观察各药物浓度下细胞染色情况。结果:对于人L02肝细胞,TRI单药作用于人L02肝细胞时对细胞的生长抑制率较高(20ng/ml TRI作用,抑制率达80.85%),NAC单药作用于人L02肝细胞时对细胞的生长抑制率也增加,当TRI联合NAC作用于人L02肝细胞时对其生长抑制率有较显著的降低(5ng/ml TRI与0.25mmol/l NAC联合作用,抑制率为5.36%)。结论:乙酰半胱氨酸可拮抗雷公藤内酯的毒性作用,对正常人L02肝细胞有解毒保护作用。
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课题研究的目的意义
雷公藤内酯具有活血化瘀、清热解毒、消肿散结、杀虫止血等功效。自20世纪80年代雷公藤被用于肾小球疾病的治疗后,许多动物实验和临床研究都证明其具有较强的抗蛋白尿作用,尤其在微小病变、局灶节段性肾小球硬化和膜性肾病患者的治疗中显示了其独特的功效。但大量研究证实雷公藤制剂常可引起肝脏、生殖系统、血液系统、胃肠道等毒性反应。故而对雷公藤制剂的减毒增效研究非常重要[7]。
N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)是抗氧化剂、巯基供给剂,也是一种自由基清除剂,在实验中及临床上都已得到广泛的应用。NAC是细胞内还原性谷胱甘肽的前体。主要作为一种粘液溶解剂应用于临床上治疗呼吸系统疾病,迄今已30多年[14]。NAC除具有粘液溶剂作用外,在还原性谷胱甘肽降低和氧化应激时以及帕金森氏病等方面也被研究和利用。由于NAC对肝脏的保护作用,其静脉和口服制剂广泛用于醋氨酚(对乙酰氨基酚)中毒所致的肝脏损害。近年来对各种原因所致肝功能衰竭的治疗作用也有报道[15]。
乙酰半胱氨酸是最重要的抗氧化活性分子之一,其基本作用为进入体内合成还原型谷胱甘肽(GSH),由此产生抗氧化作用[16]。乙酰半胱氨酸是目前对乙酰氨基酚引起肝脏损伤的临床首选解毒药,主要机制为乙酰半胱氨酸通过提供半胱氨酸合成谷胱甘肽,后者与对乙酰氨基酚的有毒代谢物结合而排出[17]。但乙酰半胱氨酸对雷公藤内酯的肝毒性的研究尚未见文献报道。
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