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MiR156转基因青蒿株系的建立

[关键词:MiR156,转基因,青蒿株]  [热度 ]
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作品编号:zygc0277,word全文:13页,合计:6500

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MiR156转基因青蒿株系的建立毕业设计论文------

青蒿素中含有内过氧桥,是一种倍半萜内酯,仅存在于一年生菊科植物青蒿中, 是治疗疟疾的有效成分,需求量极大。通过化学全合成、合成生物学进行青蒿素的体 外合成,步骤复杂、成本较高,距离产业化和临床应用还有一定距离。青蒿素唯一的 来源是从黄花蒿中得到的,但是黄花蒿植株当中的青蒿素含量比较低,只占了干重的0.1–0.8%。由此可以看出,通过基因工程的手段来提高青蒿素的含量具有非常重要的意义。

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青蒿素的药理作用

自从青蒿素的抗疟价值被开发出来以后,这类化合物就被全世界广泛关注着。虽 然截至今日抗疟疾仍是青蒿素类的药物最原始的药理作用,但是对于它的药效研究已 经不仅针对疟原虫,随着科研工作的展开,还发现对各种寄生虫病也能较好地预防和 治疗 [14]。近年来,经过国内外科研工作的展开工作,科学家们进一步通过发掘其免疫抑制、抗肿瘤和细胞免疫促进,以及治疗皮肤病、抗心律失常作用、局部麻醉等作 用,在更多的领域发挥出越来越重要的价值[15]。

展望

青蒿素及其衍生物是在我国首次发现的,之后被科学工作者研究开发出的一类新药。因为其安全、高效、快速、无耐药性等优点,迅速成为了国内外学者的关注及研究热点,并被世界卫生组织推崇为抗疟首选药物,堪称我国医药史上的一颗宝贵明珠。  青蒿中的青蒿素含量不高,而且对于不同品种的青蒿当中的青蒿素含量又存在较大的差异,再加上提取率不容乐观,这种情况下根本无法满足市场需求[16]。因此一方面需要进一步加强对青蒿的遗传育种工作,不断探索都有哪些因素会影响到青蒿素含量,  从而找到提青蒿素含量的方法,之后将优良品种进行栽培使用; 另一方面需要对青蒿素的相关提取和检测方法进行改进,只有提高青蒿素的得率,从实验室走向工业化,  才能提高经济效益[17]。世界上 70%的青蒿都分布在我国,由此可以看出我国占有很大的资源优势,因此继续将资源优势扩大为经济优势,无限的商机势必将带动我国中药在国际上的快速发展,此举也为世界抗疟疾以及其他相关疾病的治疗做出巨大贡献[18]。 可以肯定的是,通过对青蒿素及其衍生物的药理作用的深入研究,在人类健康和经济发展方面都有着十分重要的意义。

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器皿及工具灭菌

先用牛皮纸将烧杯、培养皿等玻璃器皿捆扎好,然后全部放到恒温箱里,在 160℃ 的条件下进行保温 45min,直到冷却后拿出来,把它放入超净工作台内以备用。先用70%酒精对酒精灯、打火机、镊子、手术刀等工具擦洗,然后再放到超净工作台里紫  外光下灭菌 30min。需要注意的是镊子和手术刀在使用之前需要再用酒精擦拭一遍, 然后放到酒精灯火焰上来回烧几次,之后放于已经进行灭菌过的培养皿上备用。

无菌水的制备

先将适量的蒸馏水装入三角瓶中,然后倒入高压蒸汽灭菌锅内,在 121~126℃温度下进行保温 30min,直到冷却之后拿出来,放到超净工作台里备用。

种子灭菌

先将种子放置于 70%乙醇中浸泡 5min,然后用清洁剂洗涤 10min,无菌水冲洗 4 次,在 4℃的条件下放置 72h,相关工作做好后,把它平铺到 1/2MS 固体培养基上。之后转入 22℃,昼夜节律为 16/8h 的人工气候室中培养一周左右,观察结果。

种子萌发后,将青蒿小苗移栽到营养土上培养,待青蒿无菌苗长出 5-6 片真叶后......

 

 


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