目的：运用植物的转基因技术使目的基因在植物的受体细胞中得以表达，从而取得性状优良的转基因植株，达到快速实现培育新品种植物的目的。

意义：在运用植物转基因技术培育出高产量、优质和抗逆性良好的植物新品种中，将常规的育种技术与植物转基因工程技术相结合具有很大潜力。本文通过选择大豆外植体的部位、大豆内源基因型、用于侵染大豆载体菌株、便于检测的标记基因以及各种植物添加剂等方面，通过查阅资料和请教专业知识人员设计实验，完善农杆菌介导大豆遗传转化的体系。根据实验过程出现的问题展开讨论与分析，展望了大豆的遗传转化研究方向。

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共培养培养基(CCM)：1/10MS+B5有机+6-BA1.67 mg/L+AS 0.1 mmol/L+半胱氨酸3.3 mmol/L+DTT 1 mmol/L+硫代硫酸钠1 mmol/L+蔗糖3 %+琼脂0.5 %，调pH至5.4，设PV 值121 ℃灭菌15min后，在超净工作台上分装至无菌玻璃皿中，待培养基凝固后，密封放在常温下保存备用。

芽诱导筛选培养基(SIM)：MS+B5+6-BA1.65 mg/L+MES4 mmol/L+蔗糖4 %+琼脂0.6 %+Cef 400 mg/L+Temeitin 250 mg/L+EPSPS 5-20 mg/L，调pH至5.6，设PV 值121 ℃灭菌15 min后，在超净工作台上分装至无菌玻璃皿中，待培养基凝固后，密封放在常温下保存备用。

芽伸长培养基(SEM)：MS+B5+蔗糖3%+琼脂0.7 %+GA3 0.5 mg/L+Cef 400 mg/L+IAA 0.3 mg/L+Asp 50 mg/L+Glu 50 mg/L+Temeitin 250 mg/L+PSPS 5-20 mg/L，调pH至5.6，设PV 值121 ℃灭菌15 min后，在超净工作台上分装至无菌玻璃皿中，待培养基凝固后，密封放在常温下保存备用。

生根培养基（RM）：1/2 MS+ B5+蔗糖2 %+琼脂0.7 %+IBA 1.0 mg/L+Cef 100 mg/L，调pH至5.6，PV 121 ℃灭菌15 min后，在超净工作台上分装至无菌三角瓶中，待培养基凝固后，密封放在常温下保存备用。

备注：

（1）6-BA(6-苄氨基腺嘌呤，BAP)，AS(乙酰丁香酮)，Cef(头孢霉素)，Asp(冬氨酸)，Glu(谷氨酸)，IBA(吲哚-3-丁酸)，以上均用缩写[7-14]。

（2）所有培养基的pH值均用2 mol NaOH调节，培养基须在121 ℃下灭菌15 min，植物生长激素、氨基酸等物质需过滤灭菌。

菌种的培养

方法：将农杆菌涂布在添加50 mg/L EPSPS的LB琼脂固体培养基中，置于28 ℃培养箱中培养3 d左右，待LB琼脂固体培养基上长出单菌落后，用液体悬浮培养基重悬菌体，以便侵染使用。

外植体的制备

方法：将消毒过的350颗大豆种子浸泡过夜后，在超净工作台上去除种皮，沿2片子叶中间横切，将大豆种子一分为二，切除部分顶芽，再用刀尖在子叶节处轻轻划几条伤口，获得子叶节外植体。在三角瓶中放置外植体，便于用农杆菌菌液侵染。

大豆外植体的侵染及共培养

方法：在超净工作台上，将准备好的重悬液液体浸没子叶节外植体，并密封放入28 ℃，210 r/min摇床中振摇，30 min后取出三角瓶，在超净工作台上倒掉农杆菌菌液，将侵染过的子叶节外植体转移到铺有无菌滤纸......