酶联免疫法是现在免疫分析技术中常用的一种方法，具有一定的发展前景。本文主要介绍了酶联免疫法法的一些基本情况，通过酶联免疫法的历史发展、原理、检测抗原抗体的方法、检测步骤、酶联免疫法的应用五个方面对酶联免疫法进行简单的介绍。也对公司所用酶联免疫法生产的主要产品试剂盒做了简单的介绍，主要产品有四种试剂盒，从试剂盒的主要成分、试验原理、试验步骤三方面介绍。最后是分析实验过程中遇到的一些问题并提出解决方案，主要问题分为三个方面即环境因素、设备因素和内在因素，再针对这三方面问题提出解决方案。

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试验原理

本试剂盒采用双抗原夹心发和双抗体夹心法酶联免疫吸附试验原理，在微孔条上包被重组HIV抗原和抗P24单抗，血清中的抗体和微孔板上包被的抗原结合再配以生物素抗体双抗原形成双抗原夹心，抗原和微孔板上包被的抗体再和酶标记抗原形成双抗体夹心。通过酶催化底物显色来检测[10]。

试验过程

在做实验前将需要用到的实验用品提前准备好，实验用到的生物素、酶和一些指控品都是需要4℃条件储存，实验前需室温平衡半小时。第一步是加样，每板实验应设置三孔阴性对照，1型、2型、抗原阳性对照个一孔，没孔加入生物素二十微升，空白孔除外，再在相应孔中加入待测样品或阴阳性对照一百微升，轻轻振荡混匀并盖上盖板膜37℃温育一个小时。温育完后用洗板机洗五次板，最后一次洗板后用毛巾扣干，没孔加入酶标试剂一百微升盖上盖板膜37℃温育半小时，温育完后再洗板五次，最后一次用毛巾扣干，没孔加入显色剂A、B液各五十微升后再次37℃温育半小时，最后温育完没孔加终止液五十微升，用酶标仪读数，酶标仪波长为四百五十纳米。用空白孔调零后测定各孔A值[11]。

丙肝抗体诊断试剂盒（HCV）

主要组成成分

主要成分有酶标板、生物素试剂、酶标试剂、阴阳性对照、浓缩洗涤液、显色剂A、B液、终止液等等。

试验原理

本实验是运用双抗原夹心酶联免疫法检测待检血清中的HCV抗体[12]。微孔条上包被有抗原，微孔条上的抗原、待检样品中的抗体和酶上标记的抗原反应。产生一种复合物，酶会催化底物生成有色物质。若不显色则血清中不含丙肝抗体；反之则含丙肝抗体。

试验过程

实验前将实验用品从4℃条件取出放在室温条件平衡半小时，应在微孔板上设置三孔阴性对照、两孔阳性对照和一个空白孔。首先在微孔板上加五十微升生物素和五十微升待检样品37℃反应一个小时，反应结束后在洗板机上洗五次板，最后一次用毛巾扣干，再在加了样品的孔中加入一百微升的酶标试剂在37℃反应半小时，反应完后再次洗板五次，洗完后在每孔加入底物A、B液各五十微升，反应半小时后加入终止液五十微升，最后在酶标仪上读数。

乙肝表面抗原诊断试剂盒（HBsAg）

主要组成成分

主要成分有、酶标板、样品稀释液、酶标试剂、阴阳性对照、浓缩洗涤液、显色剂A、B液、终止液等等。

试验原理

本试验采用双抗原夹心法检测待检样品中HBsAg，在......